Једном када ћелије у којима узгајамо

фабрика ћелијасу контаминирани, већина њих је тешко руковати.Ако су контаминиране ћелије вредне и тешко их је поново набавити, следеће методе се могу користити за њихово уклањање.

1. Користите антибиотике

Антибиотици су ефикаснији у убијању бактерија уфабрике ћелија.Комбиновани лекови су ефикаснији од самих лекова.Превентивни лекови су ефикаснији од лекова након контаминације.Превентивни лекови углавном користе двоструки антибиотик (пеницилин 100у/мЛ плус стрептомицин 100μг/мЛ).Након контаминације, метода чишћења треба да буде 5 до 10 пута већа од уобичајене количине.Лек треба користити 24 до 48 сати након додавања, а затим га заменити уобичајеном рутином.Културна течност.Ова метода може бити ефикасна у раним фазама контаминације.Поред пеницилина и стрептомицина, антибиотици који се користе могу такође укључивати гентамицин, канамицин, полимиксин, тетрациклин, нистатин, итд. Обично се користе 400 до 800 μг/мЛ канамицина или 200 μг/мЛ тетрациклина.Подлога се мења свака 2 до 3 дана и преноси на 1 до 2 генерације ради лечења.Последњих година је објављено да су 4-флуоро, 2-хидроксихинолин (Ципрофлоксацин, Цип), Плеу-ромутилин дериват (Плеу-ромутилин дериват, БМ-Цицлин2: БМ-1 и дериват тетрациклина (БМ-2)) антибиотици. ефикасан у убијању микоплазме када се користи сам или у комбинацији.Сва ова три антибиотика се припремају у 250Кс концентроване растворе у ПБС-у и чувају на -20°Ц за каснију употребу.Употребна концентрација Цип је 10 μг/мЛ, БМ-1 је 10 μг/мЛ, а БМ-2 је 5μг/мЛ.Када користите, прво аспирирајте контаминирани медијум културе, додајте РПМИ1640 медијум за културу који садржи БМ-1, затим аспирирајте медијум за културу након 3 дана, додајте РПМИ1640 медијум културе који садржи БМ-2, и културу 4 дана, и тако 3 узастопна дана .рунди, док се микроскопијом флуоресцентног бојења 33258 не докаже да је микоплазма елиминисана, онда се додаје нормална подлога за културу и пасаж 3-4 пута.

2. Термички третман

Инкубација контаминиране културе ткива на 41°Ц током 18 сати може убити микоплазму, али има штетне ефекте на ћелије.Стога, прелиминарни тест треба да се спроведе пре третмана како би се истражило време загревања које може да убије микоплазму у максималној мери и да има најмањи утицај на ћелије.Овај метод је понекад непоуздан.Ако се прво лечи лековима, а затим загрева на 41°Ц, ефекат ће бити бољи.

3. Користите серум специфичан за микоплазму

Контаминација микоплазмом се може уклонити са 5% имунолошког серума микоплазме зеца (титар хемаглутинације 1:320 или више).Пошто специфично антитело може да инхибира раст микоплазме, оно постаје негативно 11 дана након третмана антисерумом и остаје негативно 5 месеци касније.је негативан.Међутим, овај метод је више проблематичан и није тако згодан и економичан као употреба антибиотика.

4. Друге методе

Поред горе наведених метода отклањања контаминације, постоје и методе инокулације и стерилизације код животиња, методе фагоцитозе макрофага, методе додавања бромоурацила у контаминиранебоце културеа затим их озрачити светлом, и методама филтрације итд., али су све тегобније и неефикасније.Стога, када једном дође до контаминације микоплазмом, осим ако није од посебно важне вредности, она се генерално одбацује и поново култивише.

контактирајте Вхатсапп & Вецхат: +86 180 8048 1709